Page 45 - Enfeksiyon Hastalıkları Kitabı

Enfeksiyon Hastalıklarında Laboratuvar Tanı 25

Şekil 3.2. Katı besiyeri tek koloni ekim şeması ve kanlı besiyerinde üreyen bakterilerin görünümü.

taz -PCR, özgüllüğü ve duyarlılığı artırılmış killerine göre farklı yöntemler geliştirilmiştir:
nested PCR, real time PCR, multipleks-PCR a. Dilüsyon ve difüzyon yöntemi
çeşitleri geliştirilmiştir. b. Kalitatif-kantitatif yöntem
Bu yöntemlerin en dikkat çekici dezavantajları: c. Manuel-otomatik yöntem
a. Çalışılan alanın kontaminasyonu ile yanlış
pozitif sonuçlar alınması Dilüsyon Metodu: Antibiyotiklerin sıvı ya
b. Hemoglobin, idrar, kristaller ve nitratlar da agar şeklinde seri dilüsyonları yapılarak ko-
gibi amplifikasyonu inhibe eden madde- nulan standart mikroorganizma miktarına olan

ler ile yanlış negatif sonuçlar alınmasıdır. etkilerinin araştırılması esasına dayanır. Tipik
olarak her bir dilüsyon 2 kat sulandırılır, spesi-

5. Seroloji: Chlamydophila pneumoniae, Co- fik bir inkübasyondan sonra, mikroorganizma-
xiella burnetii, Leptospira, Ricketsia spp. ve ları inhibe eden, minimum inhibitör antibiyotik
Treponema pallidum etkenlerinin araştırıl- konsantrasyonu bulunur (MIC). Kantitatif bir
masında hala yaygın olarak kullanılmaktadır. değer vermektedir.
Dezavantajları: Agar Difüzyon Metodu: En sık kullanılan
a. Bazı immünsüpresif hastalarda yeterli bir Kirby-Bauer disk difüzyon metodudur. Stan-
antikor yanıtı oluşamaması dartize edilmiş konsantrasyonda bakteri plak-
b. Antikor titresindeki artış haftalar ya da taki besiyerine sürülerek ekilir. Üzerine belirli
aylar sonra taranabilmekte miktarda antibiyotik emdirilmiş kağıt diskler
c. Antikorlar yeni geçirilen enfeksiyon ile ge- yerleştirilir. Belirli inkübasyondan sonra du-
çirilmiş enfeksiyon ayırımını yapamamakta yarlı antibiyotiğe, disk çevresinde önceden be-
d. Çapraz reaksiyonlar nedeniyle yanlış so- lirlenmiş zon çapında mikroorganizmanın üre-
nuçlar alınabilir. Bu nedenlerden dolayı memesi ile karar verilir. Dilüsyon ve difüzyon
seroloji diğer testlerle doğrulanmalı ya da testlerinin doğrulukları çoğunlukla benzer ol-
diğer testlerin doğrulamasında kullanıl- maktadır (Şekil 3.3).
malıdır. E Test: Kirby-Bauer disk difuzyon meto-
dunun bir varyasyonu olan “Epsilometer An-
6. Antibiyotik Duyarlılık Testleri: Çalışma şe- tibiyotik Biodisk (E Test)” kağıt strip üzerinde